АНА

Антинуклеарные антитела (АНА) на клеточной линии HEp-2 на анализаторе AKLIDES

1

Автоматизированный тест для выявления антинуклеарных антител (АНА) методом непрямой иммунофлюоресценции

Описание

Антинуклеарные антитела (АНА, антиядерные антитела) — показатель системных заболеваний соединительной ткани.

При некоторых аутоиммунных заболеваниях иммунная система пациентов воспринимает ядра (белки ядер) клеток собственных тканей, как чужие, и вырабатывает к ним антитела (антинуклеарные антитела — AHA), которые повреждают соединительную ткань. При этом аутоантитела не обладают прямым разрушающим действием на клетки человека, а способны запускать иммунологическое воспаление особенно в местах, где сосуды особенно тонки, чаще всего в почках, коже, ЦНС, синовиальной оболочке суставов, плевре.

Положительный результат АНА на клеточной линии НЕр-2 отмечается при системной красной волчанке (СКВ), системных ревматических заболеваниях и многих аутоиммунных заболеваниях, что делает его универсальным анализом в обследовании больных с аутоиммунной патологией.

Описание теста

Подготовка к исследованию: специальная подготовка не требуется.

Материал для исследования: сыворотка крови.

Метод определения: непрямая иммунофлюоресценция на клетках клеточной линии НЕр-2 с определением основных типов свечения ядра, выполняемая на автоматизированной диагностической платформе AKLIDES

Единицы измерения: полуколичественный метод: «+», «++», «+++», «++++»,

количественный метод – условные единицы флюоресценции, по которым можно диагностировать ряд заболеваний, дать оценку их активности, составить прогноз и контролировать лечение.

Показания к назначению анализа АНА

Анализ АНА показан для диагностики и дифференциальной диагностики следующих заболеваний:

Заболевания Клиническая картина, симптомы

Частота выявления

Системная красная волчанка (СКВ) Эритема кожных покровов (чаще всего на лице в виде бабочки).

Кожные поражения (сыпь, уплотнения, точечные кровоизлияния), ухудшающиеся из-за активного воздействия солнечного света.

Синдром Рейно — периодическое изменение цвета пальцев стоп и кистей (бледность, посинение и покраснение) с нарушением чувствительности и болью.

Повышение температуры тела, усталость, снижение веса, увеличение лимфатических узлов.

Боль, отечность и скованность суставов.

Неврологическая патология.

Изменение состава крови – снижение концентрации лейкоцитов, тромбоцитов и эритроцитов.

Поражение слизистой, чаще в области рта и др.

95-100 %

диагностика на ранних стадиях развития заболевания

Подострая кожная волчанка и другие разновидности кожной волчанки
Лекарственно-индуцированная

 волчанка

Симптомы, напоминающие СКВ.

Особенности:

1) Развитие на фоне приема некоторых лекарственных препаратов (чаще всего прокаинамида, гидралазина, некоторых ингибиторов АПФ и бета-блокаторов, изониазида, миноциклина, сульфасалазина, гидрохлортиазида и др.).

2) Исчезновение иммунологических нарушений и симптомов болезни после полной отмены препарата.

100%

 

Смешанное заболевание соединительной ткани (СЗСТ) или синдром Шарпа Побледнение кончиков пальцев рук и ног, отечность, чувство зябкости.

Артралгия – боль в суставах без симптомов поражения;

Полиартрит, скованность суставов по утрам.

Полимиозит (воспалительные поражения мышечной ткани) – слабость, уплотнение, атрофия мышц.

Появление на коже красных, либо белых пятен, гиперпигментация вокруг глаз.

Сухость во рту, затрудненное проглатывание.

100%
Аутоиммунный

гепатит

Непостоянная, усиливающаяся в периоды обострений желтуха, увеличение печени (гепатомегалия) и селезенки (спленомегалия).

Чувство тяжести и боли в правом подреберье, тошнота, кожный зуд, увеличение лимфатических узлов.

100%

 

Синдром Фелти

(вариант ревматоидного артрита)

 

Определяется наличием трех патологий:

1. Ревматоидный артрит

2. Спленомегалия — увеличение селезенки

3. Лейкопения — снижением количества лейкоцитов

Может сопровождаться лихорадкой, мышечной атрофией, пигментацией и язвами на коже.

95-100%
Синдром Шегрена и ассоциированные

заболевания

Сухость во рту и глазах.

Сильный зуд и краснота век, падение остроты зрения, возникновение неприятных ощущений от яркого света.

40-75%

 

Системный склероз, CREST синдром Кальциноз (воспаление и уплотнение кожи) – провоцирует склеротическое поражение суставов и внутренних органов.

Синдром Рейно — периодическое изменение цвета пальцев стоп и кистей (бледность, посинение и покраснение) с нарушением чувствительности и болью.

Склеродактилия — изменение пальцев, затруднение сгибания.

Нарушения моторики пищевода.

Телеангиэктазии — мелкие расширения сосудов на губах, лице, руках.

30-80%

 

Воспалительные миопатии (полимиозит и дерматомиозит) Воспалительные поражения мышечной ткани – слабость, боль, отечность, уплотнение, атрофия мышц.

Понижением двигательной активности.

30-80%

 

Ювенильный хронический артрит Длительное (дольше 6 недель) воспаление суставов по неустановленным причинам у детей до 16 лет. 20-50%

 

Первичный биллиарный цирроз и склерозирующий холангит Первым симптомом является кожный зуд.

Желтуха, боль в правом подреберье, повышение температуры, лихорадка, образование ксантелазм и ксантом.

Увеличение печени.

До 50%
Ревматоидный артрит Симметричный полиартрит – боль в суставах, припухлость, дефигурация суставов, атрофия прилежащих мышц.

Скованность движений.

Хроническая усталость.

Постоянная мышечная слабость.

Снижение веса.

30-50%
Антифосфолипидный синдром Артериальные и венозные тромбозы, акушерская патология, неврологические, сердечно-сосудистые, кожные нарушения. 40-50%
Воспалительные заболевания кишечника (Болезнь Крона, неспецифический язвенный колит) Боль в животе, часто напоминающая острый аппендицит, диарея, анорексиятошнотарвота, вздутие кишечника, потеря веса, свищи прямой кишки.

Слабость, усталость, повышение температуры.

До 50%
Узелковый периартериит Лихорадка, резкое снижение веса, адинамия, слабость.

Бледность, кожная сыпь, подкожные узелки в области предплечий, голеней, бедер.

Слабость, болезненность, атрофию мышц;

Полиартралгии, мигрирующие артриты крупных суставов.

Развитие почечной недостаточности, сосудистая нефропатия

15-25%
Аутоимунный тиреоидит Локальное либо диффузное (чаще всего симметричное) увеличение щитовидной железы, «узловатость». Чувство затруднения при глотании и дыхании, умеренные боли в области щитовидной железы

Снижение функции щитовидной железы: слабость, утомляемость, увеличение массы тела, выпадение волос

30-50%

При интерпретации результатов необходимо учитывать клиническую картину и другие обследования.

 Интерпретация

 Результатом определения АНА является положительный/отрицательный  результат в титре 1/80. Определение количественного показателя — единиц флюоресценции — позволяет охарактеризовать количество аутоантител у пациента.

Выявление положительных и сильно положительных результатов указывает на высокую вероятность системного ревматического заболевания или аутоиммунного заболевания печени и требует внимательного клинического, лабораторного и инструментального обследования. Отрицательный результат определения АНА значительно снижает вероятность системных аутоиммунных заболеваний.

Повышение уровня АНА в динамике указывает на обострение системного заболевания.

При выявлении положительного результата АНА необходимо постараться установить конкретные антигенные мишени антинуклеарных антител, с помощью выявления антител к двуспиральной ДНК методом непрямой иммунофлуоресценции, мультилинейного дот-анализа антинуклеарных антител, мультилинейного дот-анализа антител к печеночным антигенам и мультилинейного дот-анализа антифосфолипидных антител.

Тип свечения ядра

Кроме показателя степени флюоресценции, при положительном результате анализа описывается тип свечения ядра, по которому можно установить природу иммунного заболевания. Описано более 20 типов свечения, однако в лабораторной практике обычно используется восемь основных видов описания иммунофлюоресценции:

Тип свечения

Мишени антител

(примеры)

Заболевания

Гомогенный Хроматин (дсДНК, гистоны) СКВ, системный склероз
Гранулярный (крапчатый)

(мелко/крупно)

Нуклеопротеины

(RNP, Sm, SS-A, SS-B)

СКВ, смешанное заболевание соединительной ткани, дискоидная и подострая кожная красная волчанка, ревматоидный артрит, ювенильный ревматоидный артрит, синдром Шегрена
Ядрышковый Антигены ядрышка

(фибриллярин)

Системный склероз
Центромерный Центромера в хромосоме (CENT-B) CREST-синдром
Цитоплазматический Антигены цитоплазмы

(тРНК-синтетазы, рибосомы, органеллы)

Аутоиммунные заболевания печени, СКВ,  полимиозит
Цитоплазматический (митохондриальный) Антигены митохондрий       (антигены пируват-декарбоксилазного комплекса) Первичный билиарный цирроз
Точки в ядре Нуклеопротеины Аутоиммунные заболевания печени

Метод непрямой иммунофлюоресценции на клеточной линии НЕр2 рекомендован в качестве золотого стандарта выявления антинуклеарных антител ведущими европейскими (EASI group 2010) и американскими экспертами (ACR ANA Task force 2008). В силу многообразия антигенов антинуклеарных антител не все они могут быть очищены или синтезированы для использования в иммуноферментных тестах по выявлению антинуклеарных антител.

Важные замечания

  • Отрицательный результат у пациента с признаками аутоиммунного процесса не исключает наличия аутоиммунного заболевания.
  • ANA выявляются у 3-5 % здоровых людей (10-37 % в возрасте старше 65 лет).
  • Положительный результат у пациента без симптомов аутоиммунного процесса необходимо интерпретировать с учетом дополнительных анамнестических, клинических и лабораторных данных (риск СКВ у таких пациентов увеличен в 40 раз).

Антинуклеарные антитела могут появиться за несколько лет до первых симптомов системного заболевания.